Interpretācija par PCR rezultātiem attiecībā uz tuberkulozi

Tuberkuloze ir specifiska infekcija, tās uzmanības centrā jau gadiem ilgi var būt cilvēka audos, un pēc tam izplatīties vairākus mēnešus. Šī ir hroniska slimība, kuras optimālu ārstēšanas shēmu ir grūti atrast. Viens no iemesliem ir novēlota diagnoze, kad mikobaktērijas, kamēr cilvēka ķermenis, jau ir pielāgojušās daudzām zālēm.

Kādas mūsdienu diagnozes metodes ir pieejamas? PCR diagnostika - kas tas ir? Kā tiek veikts šis pētījums? Kādos gadījumos tuberkuloze diagnosticēta ar šo metodi un kāda ir tās būtība?

Kas ir PCR diagnoze?

Šī ir viena no vismodernākajām ne tikai slimību diagnostikas metodēm, bet arī bioloģiskā materiāla noteikšanu. PCR diagnostika tika izgudota salīdzinoši nesen. Pirms aptuveni 30 gadiem 1983. gadā kāds amerikāņu bioķīmiķis Carey Banks Mullis piedāvāja kompleksu mikroorganismu bioloģiskā materiāla atjaunošanas shēmu vienā īsajā segmentā. Pateicoties viņa atklājumam, zinātniekam tika piešķirta augstākā balva - Nobela prēmija.

Kas tas ir - PCR infekciju diagnostika? Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) ir vīrusu slimību atklāšanas diagnoze, kuras pamatā ir gēnu inženierijas metodes. To plaši izmanto medicīnas mikrobioloģijā, imunoloģijā un virusoloģijā. Metode ir universāla un palīdz noteikt diagnozi ar nelielu daudzumu materiālu. Nosakiet infekciju burtiski pirmajās infekcijas stundās, ilgi pirms slimības pirmie simptomi.

Metode ir no slimnieka materiāla iegūšana no paša patogēna, bet no genoma fragmentiem (DNS daļiņām), tās biosintēze ar turpmāku noteikšanu, uz kuru mikroorganismu klasi iegūst ģenētisko materiālu, izmantojot molekulārās ģenētiskās metodes.

Neskatoties uz to, ka tas ir sarežģīts process, tas prasa daudz mazāk laika nekā daudzas bioloģiskas metodes infekcijas izraisītāju noteikšanai. Tikai dažu stundu laikā ar PCR var konstatēt mikroorganismu. Lai to izdarītu, nav nepieciešams to izolēt no vides (asinis, cerebrospinālais šķidrums, krēpiņa) un ilgstoši augt mākslīgo barības vielu vidē. Pietiek ar to, ka pētāmā materiālā ir neliels infekcijas aģenta DNS daļas fragments.

Reakcijas pamatā ir iespēja mākslīgos apstākļos (in vitro) radīt infekcijas izraisītāja nukleīnskābju molekulu sintēzi.

Kas nepieciešams PCR?

  1. Primerji ir DNS segmenti, no kuriem sākas biosintēze vai radīšana.
  2. Nukleotīdi vai kompleksie savienojumi, kas ir DNS vai RNS molekulas pamats.
  3. Polimerāzes ķēdes reakcija nav iespējama bez polimerāzes klātbūtnes, kas ir enzīms, kas paātrina PCR.

PCR diagnostikas stadijas

Kā molekulārā diagnoze tiek veikta ar PCR? Procedūra ir vienkārša un aizņem īsu laiku, ņemot vērā materiālu kolekciju.

  1. Pirms sākat pētījumu, ņem nepieciešamo bioloģisko materiālu - tas ir bronhiālais mazgāšanas ūdens, asinis, kuņģa saturs un krēpas. Bioloģiskā materiāla veids ir atkarīgs no iespējamā patogēna.
  2. DNS primārās struktūras denaturācija vai iznīcināšana, kas sastāv no divām ķēdēm. Šīs pakāpes būtība ir divu ķēžu atdalīšana augstās temperatūras ietekmē (maksimums ir 98 ºC, kas ilgst ne vairāk kā divas minūtes).
  3. Nākamajā PCR posmā, ko sauc par atkausēšanu, temperatūra tiek samazināta par vairākiem grādiem, tādējādi grunts saistās ar DNS daļu.
  4. Pagarinājums, kura laikā tieši iegūst vajadzīgo molekulu sintēzi.

Tā rezultātā tikai 25-30 ciklus saņem nepieciešamo mikroorganismu DNS eksemplāru skaitu, kas ir viegli atpazīstams.

Vai PCR nepieciešama tuberkulozes diagnostika?

Pilnīgi visiem cilvēkiem ar aizdomām par tuberkulozi nav iespējams veikt PCR, jo šī metode prasa dārgas iekārtas. Ne visas publiskās klīnikas var atļauties to nopirkt. Turklāt tas tā notika, ka parastās infekcijas diagnostikas metodes vairumā gadījumu arī sevi pamato.

Tie ietver:

  • pacientu aptauja, vēstures uzņemšana;
  • pilnīga personas pārbaude;
  • pētījums, izmantojot tuberkulīna testu Mantoux;
  • Rentgena vai fluorogrāfija
  • nepieciešamības gadījumā datora diagnostika;
  • mikrobioloģiskās izpētes metodes: marķējuma mikroskopija un baktēriju mikroskopiskā izmeklēšana.

PCR tuberkulozei tiek veikta īpašos gadījumos, ja ir grūti noteikt diagnozi vai nav iespējams veikt citas instrumentālās metodes.

Neskatoties uz diagnostikas metožu pārsvaru, tuberkulozes izplatība turpina pieaugt. Pašlaik ir ne tikai tās izaugsme, bet arī citas funkcijas:

  • slimība bieži rodas smagā formā;
  • palielinās nāves gadījumu skaits;
  • tiek izteikti arvien izturīgāki pret modernām ķīmijterapijas zālēm.

Pašu cilvēku nevēlēšanās katru gadu veikt ikdienas veselības pārbaudes, vakcinācijas noraidīšana izraisa tuberkulozes izplatīšanos. Šādos apstākļos ir vajadzīgas ātras, informatīvas un efektīvas pētījumu metodes, kurām jābūt pieejamām bērniem un pieaugušajiem. Visas iepriekš minētās diagnostikas metodes ir daudz zemākas nekā PCR.

Tuberkulozes diagnosticēšanas priekšrocības, izmantojot PCR

Šis pētījums, lai gan jauns, ir sevi pierādījis labi, jo īpaši pretrunīgos gadījumos, kad vairāku iemeslu dēļ nav iespējams noteikt diagnozi.

Pateicoties PCR, testa materiālā ir daudz vieglāk noteikt tuberkulozes izraisītāju.

PCR diagnostikas priekšrocības ir šādas.

  1. Šī ir ātra analīze. Nelielu DNS molekulas daļu var izmantot, lai diagnosticētu tikai dažas stundas (apmēram piecas), un to veiksmīgi izmanto ārkārtas situācijās, kad, piemēram, pirms operācijas ir jānosaka, vai persona ir saslimusi ar tuberkulozi.
  2. PCR analīze ir atļauta gadījumos, kad citas metodes nav pieejamas vai aizliegtas (plaušu tuberkulozes noteikšanai, dažreiz ir nepieciešams veikt vairākus rentgenogrāfiskus attēlus, kas radīs lielu starojuma devu).
  3. Ar PCR palīdzību tiek pārbaudīta jebkāda bioloģiskā vide patogēnas klātbūtnē. Piemēram, ja Jums ir aizdomas par tuberkulozo meningītu, varat veikt cerebrospināla šķidruma pētījumu.
  4. Bērniem ir atļauta infekcijas slimību diagnostika PCR, jo šī metode ir droša.
  5. Ļauj identificēt patogēnu jebkurā slimības stadijā.
  6. Augsta PCR jutība ļauj konstatēt Mycobacterium tuberculosis pat tad, ja bioloģiskajā materiālā ir tikai daži mikroorganismi.
  7. Ir labi veikt slimības atkārtošanās diagnozi.

Pēc tam visa lasītā PCR šķiet gandrīz ideāla diagnostikas metode, kas jādara visiem, kam ir aizdomas par tuberkulozi. Bet šeit ir arī trūkumi, tie jāapsver.

PCR trūkumi tuberkulozes diagnostikā

Mūsdienās šāda diagnostika ir retāk nekā regularitāte. Un šim ir iemesls.

  1. Šī ir dārga pētījumu metode. Daudzās klīnikās sakarā ar augsto izmaksu dēļ PCR iekārtas nav, bet analīzes vēl var veikt apmaksātās laboratorijās.
  2. Tūlīt pēc ārstēšanas cilvēka ķermenī joprojām var būt mirušas mikobakterijas vai dzīvot nelielos daudzumos (rezultāts būs pozitīvs, veicot PCR diagnostiku), tādēļ šajā laikā metode būs neprecīza, nav jēgas to veikt.
  3. Mikobaktēriju mutācijas izraisa neefektīvu PCR - normālu DNS virknes secību nevar sintezēt.
  4. Ir nepieciešams izvēlēties pareizo vidi pētījumam, asinis tiek ņemtas tikai tad, ja ir aizdomas par inficēšanos (sepsi), nav vajadzības lietot krēpi, ja rodas jautājums par nervu sistēmas orgānu tuberkulozi. Šajā gadījumā PCR nevarēs noteikt patogēnu, un diagnoze nebūs informatīva.

Indikācijas tuberkulozes noteikšanai, izmantojot PCR analīzi

Pārliecinošos gadījumos visbiežāk tiek veikta tuberkulozes PCR diagnostika. Kad ārsti atsaucas uz šo pētījumu?

  1. Ja ir grūti noteikt diagnozi, izmantojot parastās pieejamās metodes, bet ir saskare ar tuberkulozes slimnieku.
  2. Gadījumā, ja personai nav iespējams nogādāt poliklīnikā par regulāru ikdienas pārbaudi tuberkulozes ārstēšanai, to ir vieglāk pārbaudīt, izmantojot PCR, jo pārbaudei paredzēto krēpu var piegādāt burkā, un diagnoze tiek apstiprināta dažu stundu laikā.
  3. Ja personai ir ārkārtas situācija, ir steidzami jānoskaidro, vai viņš ir saslimis ar tuberkulozi.
  4. Ja nepieciešams, grūtniecei labāk ir arī kontrolēt tuberkulozi, izmantojot PCR, jo šī metode ir droša.
  5. Pabalsti var diagnosticēt ikviens, kurš nav apstiprinājis tuberkulozi ar bakterioloģiskām metodēm un fluoroskopiju. Tas notiek, ja tiešais tēlā bojājums plaušās ir neuztrūks, un persona, kura pētījuma laikā piegādā krēpu, nevarēja ievērot ieteikumus par pareizu materiāla savākšanu. Šajā gadījumā cilvēks uztraucas par visiem simptomiem, kas raksturīgi plaušu tuberkulozei.
  6. Ja rodas šaubas par Mantoux testa rezultātiem.
  7. Bērniem ir ieteicams veikt tuberkulozes diagnosticēšanu PCR. Procedūra ir droša, nerada papildu radiācijas iedarbību, un tā ir efektīva slimības formu sarežģītas diagnosticēšanas noteikšanā.

Savlaicīga tuberkulozes diagnostika ir pareizas ārstēšanas atslēga un slimības izplatības samazināšana. Bieži vien pazīstamās slimību noteikšanas metodes ne vienmēr ir efektīvas. Tāpēc PCR šodien ir viens no visuzticamākajiem un drošākajiem veidiem infekcijas noteikšanai agrīnās attīstības stadijās.

Bērnu un pieaugušo tuberkulozes PCR diagnoze

Modernās diagnostikas metodes (pcr, diaskintest, quantiferon tests) ir ļoti efektīvas, taču praksē pētījumi nav pārbaudīti. Tuberkulīna diagnostika bija pamats inficēto un slimu cilvēku identificēšanai.

Metode ļāva identificēt daudz slimu cilvēku, samazinātu saslimstības statistiku, mirstību.

Mikebaktēriju un krēpu mikroskopijas sēšana saskaņā ar Zil-Nelson ļauj droši diagnosticēt infekciju. Problēma rada precīzu krēpu ņemšanu tieši no skartajiem bronhiem. Tuberkulozes procesa fona ietekmē būtiska bronhiālā koka daļa. Pēc baktēriju inokulācijas ir iespējams pārbaudīt patogēna jutīgumu pret antibiotiku.

Analizējot fizioterapeitu diagnostikas rezultātus, kļuva skaidrs, ka Koch spiegu izdalīšanās trūkums nenozīmē, ka organismā nav infekcijas. Cēloņsakarību var noteikt pēc otrā, trešā, ceturtā materiāla ņemšanas.

Modernās diagnostikas metodes (dst, Quantiferon tests) atklāj mikobaktērijas ar aktīvu slimības gaitu. Mikobaktēriju klātbūtnē limfmezglos, ar ārpuslīnijas slimības formām, pārbaudes visbiežāk ir negatīvas.

Savlaicīga diagnostika ir pamats, lai novērstu nopietnas slimības sarežģījumus un bīstamās sekas.

Mūsdienu metodes

Klasiskās tuberkulīna diagnozes nomaiņa ir diaskintests (dst). Saskaņā ar jaunākajiem noteikumiem pētījumā jāaizstāj standarta Mantoux tests, kas ļāva identificēt daudzus saslimstības un infekcijas gadījumus starp iedzīvotājiem.

Diaskintest būtība, kā arī tuberkulīna diagnoze ietver subkutāno tuberkulozes patogēnu olbaltumvielu ievadīšanu. Reaģējot uz injekciju, tiek attīstīta paaugstinātas jutības reakcija ar specifiskām ādas izmaiņām: apsārtums, indurācija, pūslīši.

Diaskintest pozitīvs rezultāts ir tipisks pacientiem ar aktīvu slimības gaitu. Ja inficēts vai palielināts alerģizācijas pētījums būs negatīvs. Negatīvais dst efekts var būt spēcīgas imunitātes rezultāts, bet, ja tas ir inficēts ar cilvēku.

Salīdzinot ar Mantu, Diaskintest ir daudzpusīgāks un jutīgāks veids, kā diagnosticēt tuberkulozi. Infekcijas atklāšanas trūkums prasa to vienlaicīgi lietot ar tuberkulīna diagnozi.

Neraugoties uz klīnisko pētījumu rezultātiem, zinātnieki apgalvo, ka šī metode ir universāla un jutīga, pētījumu nevar uzskatīt par universālu diagnostikas risinājumu.

Izmēģinājumu ir izstrādājuši Sechenov Research Institute akadēmiķi. Alerģiju trūkums, lietojot diaskintest, ir saistīts ar sugu specifisko tuberkulozes proteīnu subkutāno ievadīšanu. Pēc ievadīšanas to nosaka ādas reakcija, kas izpaužas kā apsārtums, plombas.

Kas ir quantiferon tests

Quantiferon testu novērtē pēc pacienta asiņu ņemšanas. Procedūras mehānisms ir noteikt gamma-interferonu, ko atbrīvo T-limfocīti pēc sanāksmes ar mikobaktēriju tuberkulozi. Testi nosaka tuberkulozes proteīnus, kas satur ne tikai cilvēka un govju baktērijas. QuantiFERON testu var izmantot arī, lai diagnosticētu mikobakteriozi, ko izraisa citas mikobaktērijas, kuras veido rentgenos specifiskas izmaiņas. Testa rezultātu nosaka vairākās mēģenēs, kas palielina metodes diagnostisko jutību.

PCR bērna tuberkulozes diagnosticēšanai

Polimerāzes ķēdes reakcija ir precīza, bet dārga tuberkulozes diagnosticēšanas metode. PCR tiek veikta pēc bronhoskopijas.

Pēc negatīvu rezultātu saņemšanas ir racionāli veikt polimerāzes ķēdes reakciju. Rezultāti tiek vērtēti pēc Mycobacterium tuberculosis trīsreizējās krūts audzēšanas. Vislabvēlīgākajos apstākļos patogēna identifikācija norāda uz infekciju. Ķemoprofilakses mērķis ļauj izvairīties no aktīva tuberkulozes procesa Koch spiežu klātbūtnē.

Saņemot mikroorganisma celmu, ir iespējama antibiotiku jutīguma palielināšanās. To antibiotiku noteikšana, kas var nogalināt mikroorganismus, ļauj mums novērtēt, kuras zāles infekcijas ārstēšanai.

PCR bērniem tiek veikta ar negatīviem sēšanas rezultātiem, bet, ja ir tuberkulīna testa pagrieziens, inficēšanās ar rentgenstaru pazīmēm vizualizācija, pašreizējās infekcijas klīnisko simptomu noteikšana.

Polimerāzes ķēdes reakcija nodrošina augstu precizitāti (aptuveni 99%). Metode ir balstīta uz nukleīnskābju amplifikāciju. Mikobaktērijām, vīrusiem un citiem mikroorganismiem ir unikālas nukleotīdu sekvences. Viņu diagnoze ļauj identificēt slimības izraisītāju.

PCR jutīgums bērniem ir mazāks nekā pieaugušajiem. Praksē tika konstatētas šādas polimerāzes ķēdes reakcijas pazīmes bērnībā:

  1. Specifiskums - 80-100%;
  2. Jutība - 25-80%.

Neskatoties uz metodes augsto precizitāti, iegūstot negatīvu rezultātu, nenozīmē, ka bērniem nav tuberkulozes. Racionālāka metodes izmantošana pacientiem ar imūndeficīta stāvokli. Ārkārtas tuberkulozes infekcijas diagnostikā.

Interpretācijas kļūdas nosaka pārkāpumi pētījuma materiāla apkopošanā un sagatavošanā.

Pētījuma negatīvā rezultāta iemesli tuberkulozes diagnostikā

Sadalījums no organisma Mycobacterium lymphogenous (jo limfvadu), un hematogenous (asinīs), nokārtojot sniedz daudz audus, rašanos ekstrapulmonālu infekcijas perēkļi.

Ja plaušu iznīcināšanas (iznīcināšanas) ērču noteikšana rentgena noteikšanā nav nepieciešama PCR. Pieaugušajiem, izmantojot radiogrāfiju, ir iespējams identificēt ritošās formas ar augstu uzticamības pakāpi.

Bērniem PCR pētījums tiek izmantots biežāk, jo latentā mikobaktēriju lokalizācija limfmezglos ir novedusi pie negatīviem rezultātiem, izmantojot citas diagnostikas metodes. Ar baktēriju kultūru ir pietiekami konstatēt apmēram 10 mikroorganismus. Jāpatur prātā, ka ne visi ir atbildīgi par aktīvu plaušu tuberkulozi.

Lai pareizi diagnosticētu PCR, baktēriju sēklas, DST, jāievēro šādas prasības:

  1. Uzglabāt materiālu sterilās lampās;
  2. Novērst citu baktēriju iekļūšanu;
  3. Veicot transportēšanu, ievērojiet personīgo higiēnu, lai biomateriāls netiktu pakļauts ķermenim, sejai un elpceļiem.

Saglabātā asinis ar konservantu EDTA. Katrai laboratorijas analīzei ir īpašas materiāla sagatavošanas iezīmes, kuras eksperti ir pazīstami.

Novatoriskas diagnostikas metodes

Infekcijas agrīna atklāšana ļauj savlaicīgi pārtraukt ķīmijterapiju, lai novērstu smagu slimību.

Klīnikas izdzēšana bērnībā, nepietiekami testa rezultāti, analfabēta paraugu novērtējuma interpretācija neļauj savlaicīgi inficēties. Lai novērstu saslimstību ar zīdaiņiem, ir nepieciešama rūpīga rezultātu analīze, ar iespēju diagnosticēt agrīnā stadijā.

Mūsdienīga tuberkulozes laboratorijas diagnosticēšanas metode bērniem - TAB-TM noteikšana

Reakcija uz T-šūnu marķiera definīciju bērniem, ko sauc par "TAB-TM", raksturo ar augstu jutīgumu. Metodes būtība ir identificēt īpašu diferenciācijas klasteru (CD-27), kas lokalizējas T-limfocītu virsmā. Pēc šī faktora izdalīšanas citokīni krāso ar citometriju.

Metodi literatūrā sāka aprakstīt 2014. gadā. Novērojumu rezultāti liecina, ka metode ir ļoti jutīga. TAB-TM noteikšana ir tieša metode tuberkulozes diagnosticēšanai pēc krēpas pārbaudes.

Tika parādīts tuberkulozes asins analīzes

Sākotnējā posmā tuberkulozes infekcija turpinās bez specifiskiem klīniskiem simptomiem. Laboratoriska diagnoze bērniem kļūst iespējama, ja Koch zizlis reizinās.

Kādas šūnas tiek novērtētas tuberkulozā procesā, veicot laboratorijas asins analīzes:

  1. Sarkanās asins šūnas ir sarkanās asins šūnas, kas ir atbildīgas par skābekļa transportēšanu uz audiem. Ar plaušu tuberkulozes gaismas plūsmu no sarkanās asinsrites sāniem nav patoloģisku izmaiņu. Iznīcinoša fokusa klātbūtne veicina asiņošanu ar asins anēmiju. Stāvoklis attīstās ar tuberkulozo iekaisumu zarnu sienā. Retikulocītu skaits uz patoloģijas fona palielinās vairāk nekā par 1%;
  2. Leikocīti palielinās ar jebkuru infekciju. Leikocitozi papildina leikokrama maiņa pa kreisi. Sākotnējā stadijā var novērot segmentēto neitrofilu skaita pieaugumu. Smaga tuberkuloze ar gūto saplūšanu, imūndeficīta stāvoklis, tiek novērota leikopēnija (asins leikocītu skaita samazināšanās). Tajā pašā laikā palielina limfocītu saturu (vairāk nekā 20%);
  3. Eozinofiliju var izsekot līdz sākuma posmam. Šis stāvoklis rodas, kad dažādu orgānu infiltrāti ir tuberkulozi. Smaga tuberkuloze ar dezintegrāciju pieaugušajiem izraisa pilnīgu eozinofilu neesību;
  4. Basofilu uzlabošana.

Tuberkulozes laboratoriskās pārbaudes nav specifiskas ne bērniem, ne pieaugušajiem. Šādas izmaiņas ir raksturīgas daudzām baktēriju vai vīrusu infekcijām.

Hemogrammas indikatori rada ieinteresētību ftiziatriķiem, lai noteiktu tuberkulozes infekcijas stadiju.

Ar aktīvu infiltrāciju, leikocitoze var tikt izsekota, palielinoties neitrofilu skaitam. Šūnās parādās patoloģisks smiltis, kas liecina par asins intoksikāciju.

Sadalīšanās centri samazina eozinofilu, neitrofilu, jauno formu, limfocītu skaitu. Ja notiek izplatīšanās, rodas absolūts monocitoze. Pret spontāno rezorbciju palielinās limfocītu un eozinofilu skaits.

Pēc centru apvienošanas hemogrāfiju raksturo pārmaiņas.

Bērna tuberkulozes testi: tuberkulīna diagnoze

Ilgu laiku phthiasatricians iestudināja Mantoux reakciju. Šādas tuberkulozes pārbaudes ļāva konstatēt ne tikai aktīvo infekciju, bet arī infekciju. Parauga būtība bija subkutānas tuberkulīna injekcijas - vielas, kas izraisīja ķermeņa alerģiju. Mīklu izmanto materiālu, kas iegūts no Micobacterium Bovis. Pēc subkutānas injekcijas tiek iegūta papula, kas atspoguļo ķermeņa reakciju uz mikobaktēriju iekļūšanu:

  1. Normal papule - izmērs no 5 līdz 16 mm;
  2. Ja nav reakcijas - vājina imūnsistēmu, mikobaktēriju trūkums;
  3. Liela papulja - baktēriju antigēnu klātbūtne, sazinoties ar tuberkulozes baktēriju nesēju.

Metode netiek uzskatīta par ticamu, jo ir daudz nepareizas pozitīvas reakcijas. Ja apšaubāmajiem rezultātiem nepieciešams apstiprinājums PCR. Ar Diaskintest (dst) parādīšanās situācija ir mainījusies. Kombinēts metožu pielietojums ļauj iegūt ticamākus rezultātus.

Klasiskie "ftizioloģiskie" veidi, kā diagnosticēt tuberkulozi

Bērniem un pieaugušajiem tuberkulozes diagnosticēšanai ftiziatriji izmanto šādus testus:

  • Pētījuma par pacienta vēsturi (kontakts ar pacientu vai tuberkulozes bacillus nesēju). Sociālo riska faktoru noteikšana palīdz ierosināt iespējamu infekciju;
  • Tuberkulīna jutības (Mantou testa) novērtējums ar PPD tuberkulīnu devā 5-10 TE. Rezultāta novērtējums tiek veikts 48-72 stundas;
  • Rentgenoloģiskā izmeklēšana tiek veikta bērniem un pieaugušajiem ar aizdomām par tuberkulozi, tuberkulīna testu saliekšanu;
  • Bakterioloģiskā kultūra ir neapgāžams Mycobacterium tuberculosis izraisītu infekciju pazīmes. Pareiza krēpu vākšana, patogēna noteikšana kuņģa mazgāšanā, tuberkulozes testus var uzskatīt par pozitīviem. Koča zizlis ir atrodams pēkšņos abscessos, limfmezglos, asciātos izsitumā, pleiru eksudātā, urīnā, cerebrospinālajos šķidrumos;
  • Eritrocītu sedimentācijas ātrums palielinās ar jebkuru infekciju, tai skaitā tuberkulozi;
  • PCR ļauj identificēt specifisku patogēnu, bet pētījums ir dārgs;
  • Diaskintest nosaka plaušu tuberkulozi, bet bieži vien iegūst negatīvus rezultātus infekcijas ārpuslīnijas lokalizācijā.

Modernā tuberkulozes diagnostika, izmantojot metožu kompleksu, ļauj organismā noteikt mikobaktēriju ar augstu ticamības pakāpi. Izmantojot esošās metodes, tiek konstatēts aktīvs process vai infekcija. Mums ir nepieciešams tikai laiks sazināties ar ekspertiem!

PCR priekšrocības un trūkumi (a) tuberkulozes diagnosticēšanai

Daudzus gadus cilvēka audos un struktūrās ir konstatēta specifiska tuberkulozes infekcija, un noteiktos apstākļos tas 2-3 mēnešus ātri izplatās visā organismā. Dažreiz ir grūti izvēlēties optimālo ārstēšanas kursu, jo novēlota diagnoze un patogēna pielāgošana daudzām zālēm.

Jaunākā tuberkulozes PCR diagnoze palīdz noteikt ne tikai attīstīto slimību, bet arī pašu patogēnu, kad vēl nav parādījušās pirmās slimības pazīmes.

Kas ir PCR?

Nesen ir parādīta tuberkulozes diagnostika ar PCR. 1983. gadā kāds mikrobiologs no Amerikas Cary Mullis izgudroja procedūru, pēc kuras mikroorganismus no bioloģiskā materiāla rekonstruēt īsā segmentā. Šis darbs ir nopelnījis Nobela prēmiju.

PCR tuberkulozei ir polimēru ķēdes process, kurā vīrusu patogēnu diagnostika un noteikšana ar gēnu inženierijas palīdzību. Šo metodi izmanto imunoloģiskajās, mikrobioloģiskajās, virusoloģiskajās un bioķīmiskajās laboratorijās.

Universālā metode palīdz ārstiem diagnosticēt un konstatēt infekcijas procesu pat pēc pirmām infekcijas stundām ilgi pirms simptomu rašanās. Pētniecība ir iespējama arī ar nelielu daudzumu biomateriālu.

Kas nepieciešams analīzei?

  • Vairāki DNS fragmenti (primerīši), ar kuriem sāk bioloģiskā sintēze;
  • Nukleotīdu savienojumi, pamatojoties uz DNS molekulu vai RNS;
  • Polimerāzes enzīms, kas paātrina PCR analīzi.

Kāds ir metodes pamatā?

Pirmkārt, no inficētās personas biomateriālu iegūst DNS segmentu, izmantojot gēnu molekulāro biosintēzes metodes, tālāk nosaka mikroorganismu tipu, pie kura pieder biofragmenta.

Šī sarežģītā reakcija aizņem mazāk laika nekā dažas biometodes. PCR dažu stundu laikā nosaka patogēnu, bet nav nepieciešams to izolēt no bioloģiskā šķidruma (krēpas, cerebrospināla vai asins barotne), nav nepieciešams ilgu laiku augt uzturvielu barotnē. Pietiek ar to, ka pētītajā materiālā ir infekciozā patogēna DNS daļa.

Veicot PCR asins analīzi tuberkulozei in vitro, mycobacterium tuberculosis ribonukleīnskābju sintēze tiek radīta mākslīgi.

Diagnostikas posmi

Molekulārā reakcija ar PCR ir vienkārša procedūra, kas aizņem maz laika. Nepieciešamais biomateriāls tiek ņemts: asinīs, krēpās, bronhu mazgāšanas šķidrumā izmanto tbc.

  1. Pirmkārt, iznīcina DNS primāro formu, 2 augstas ķēdes ķēdes atdala (maksimums 98 ° C ne vairāk kā 2 minūtes);
  2. Tad tiek veikta atdeve, primārā temperatūra tiek samazināta par vairākām daļām, DNS daļa ir saistīta ar gruntiņu;
  3. Nākamais posms tiek saukts par pagarinājumu, ar vajadzīgo molekulāro struktūru biosintēzi.

Lai iegūtu vajadzīgo DNS eksemplāru skaitu, no 25 līdz 30 šādiem cikliem ir jānokārto, un iegūtais mikobaktēriju skaits ir viegli atpazīstams.

Vai ir nepieciešams veikt PCR attiecībā uz tuberkulozi?

Tieši visiem pacientiem, kuriem ir aizdomas par TVC, ķēdes diagnostika nav pabeigta, jo procedūrai ir jāizmanto dārgas iekārtas. Ne visas valsts medicīnas iestādes to var iegādāties, jo īpaši tāpēc, ka parastās mikobaktēriju tuberkulozes diagnostikas metodes ir arī informatīvas.

  • Uzmanīga anamnēzes uzņemšana, pacienta nopratināšana;
  • Vizuāla pārbaude;
  • Mantoux tuberkulīna tests;
  • Radiogrāfiska vai fluorogrāfiska izmeklēšana;
  • Ja nepieciešams, datora diagnostika;
  • Mikroskopiskā vai bakterioloģiskā izmeklēšana ar masku ar krēpu.

PCR tuberkulozei tiek veikta tikai tad, ja nav iespējams veikt citu instrumentālo analīzi vai apstākļos, kurus ir grūti diagnosticēt.

Neskatoties uz to, ka viņi izgudroja ļoti daudzas diagnostikas metodes, tuberkulozes slimnieku skaits turpina pieaugt. Turklāt saslimstība ir ieguvusi dažas iezīmes: bieži tiek novērota smaga slimības forma, mirušo skaits palielinās, patogēns kļūst izturīgs pret esošajām ķīmijterapijas zālēm.

Daudzi cilvēki nevēlas katru gadu veikt ikdienas pārbaudi, atsakās no vakcinācijas, kas izraisa saslimstības pieaugumu. Šādi apstākļi prasa efektīvas un informatīvas pētīšanas metodes, kas pieejamas pieaugušajiem un bērniem, kuriem diagnosticēts TBB. PCR ir priekšrocības salīdzinājumā ar citām diagnostikas metodēm.

Kāda ir metodes vērtība?

Šis jaunākais pētījums ir sevi pierādījis labi. Ja vairāku iemeslu dēļ ir grūti noteikt diagnozi vai dažos pretrunīgos gadījumos, PCR var bioloģiskajā materiālā atklāt tuberkulozes bacillus vieglāk nekā citas metodes.

  • Šis ātrais pētījums, neliels molekulas fragments ļauj veikt precīzu diagnostiku īsā laikā apmēram 5 stundas, to lieto ārkārtas situācijās, piemēram, pirms steidzamas ķirurģiskas iejaukšanās;
  • Tuberkulozes asins analīzes ir iespējamas, ja citas metodes nav pieejamas vai tās ir kontrindicētas - reizēm tbc patogēna noteikšanai jāizmanto daudzi Rg attēli, radiācijas deva ir pārāk liela;
  • Izmantojot polimerāzes reakciju, var pārbaudīt jebkuru bioloģisko šķidrumu mikobaktēriju klātbūtnē. Piemēram, jūs varat veikt pētījumu par cerebrospinālajiem šķidrumiem tuberkulozā meningīta vai urīna urīnizvadkanālā tuberkulozes gadījumā;
  • Metode ir droša, tuberkulozes diagnostika bērniem, kas izmanto PCR, nerada grūtības;
  • Polimēru reakcijas metode atklāj tuberkulozes bacillus jebkurā slimības formā un stadijā;
  • Tikai dažu baktēriju klātbūtne biomateriālā ļauj jums redzēt mikroorganismu klātbūtni, jo tā ir jutīga reakcija;
  • PCR viegli diagnozē slimības recidīvu.

Neskatoties uz milzīgo priekšrocību skaitu, visi pacienti ar aizdomām par TBC pētījumu nav pabeigti, jo ir arī trūkumi, arī tie tiek ņemti vērā.

Video

Video - agrīna diagnostika

Kādi ir trūkumi?

Šī diagnostikas metode ir diezgan izņēmuma, nevis dabiska, jo tam ir iemesli. Pirmkārt, tiek ņemtas vērā metodes augstās izmaksas. Iekārtas ir dārgas, publiskām klīnikām nav iespējas to iegādāties augstās cenas dēļ, bet lielākajai daļai no maksas laboratorijām ir iekārtojums, tajā tiek veikta analīze.

  • Metode nosaka nogalinātās baktērijas, kas mirušas pēc ārstēšanas, bet PCR ir pozitīvs rezultāts. Tūlīt pēc ķīmijterapijas nav jēgas veikt pētījumu, jo rezultāts būs neuzticams;
  • Mycobacterium tuberculosis mutācijas ir uzņēmīgas, kas noved pie metodes neefektivitātes, un DNS virkni nevar sintezēt konsekventi.

Pētījuma vidi rūpīgi jāizvēlas, asins vai urīnu var savākt tikai tad, ja ir aizdomas par infekciju. Ja ir aizdomas par kaulu tuberkulozi, flegma pārbaudi nedrīkst veikt. Šajā situācijā diagnoze būs nepareiza.

Reti tiek pētīta tuberkulozes slimnieka asinīs un urīnā ar PCR, tādēļ šāda veida slimības identifikācija ir apšaubāma. Šajās biomedijās patogēnu nosaka tikai sepse vai izplatītas tuberkulozes gadījumā. Visbiežāk sastopamas vietējās formas, to asinis un urīns var palikt nemainīgi. Visbiežāk krēpu tiek ņemta pārbaude.

Kas parāda analīzi?

Lielākā daļa pacientu tiek nosūtīti PCR diagnozei pretrunīgos un sarežģītos tuberkulozes gadījumos. Kad medicīnas speciālisti izraida novirzes pētniecībai?

  1. Ja ir saskare ar personu, kura ir ticami diagnosticēta ar tuberkulozi, bet to ir grūti diagnosticēt, izmantojot parastās metodes;
  2. Šādos apstākļos, ja pacients klīnikā nav iespējams veikt radiogrāfiju vai citus pētījumus. Šādā situācijā ir vieglāk to pārbaudīt, izmantojot polimēru metodi. Krēpu analīze tiek vienkārši nogādāta laboratorijā speciālā traukā, un rezultāts kļūst zināms pēc dažām stundām;
  3. Pirms operācijas steidzami jānosaka, vai pacients ir saslimis ar tuberkulozi, un šādā gadījumā ir norādīta PCR;
  4. Sakarā ar metodes drošību, ir iespējams veikt grūtnieces vai bērna pārbaudi, neradot papildu rentgena slodzi;
  5. Apšaubāmi Mantou testa rezultāti.

Ikviens, kurš vēlas, var pārbaudīt par maksu, ja tuberkuloze nav apstiprināta ar bakterioloģijas un fluoroskopijas palīdzību. Tas notiek, ja tiešā projekcijā Rg attēla plazmas audu bojājums ir neredzams, un pacients nevar pareizi savākt krēpu, bet tiek traucēta cilvēka tuberkulozes pazīme.

Mūsdienu PCR reakcija diagnozei ir veiksmīgas ārstēšanas atslēga, kā rezultātā slimības izplatība samazinās. Tradicionālās sāpju noteikšanas metodes ne vienmēr rada vēlamo efektu.

Līdz ar to PCR analīze līdz šim ir kļuvusi par vienu no drošām un drošām diagnozes metodēm slimības agrīnās stadijās.

PCR analīze tuberkulozei

PCR analīze tuberkulozei ir vispopulārākais medicīnas pētījumos šīs slimības jomā.

Bet kā brīdināt sevi un savus mīļotos no šīs briesmīgās slimības? Kā veikt vajadzīgos PCR testus?

Tuberkulozes simptomi un profilakse

Eksperti saka, ka apmēram 30% no kopējā iedzīvotāju skaita ir tuberkuloze.

Vislielākais slimības procents ir attīstīts neattīstītajās valstīs. Tas visbiežāk rodas cilvēku samazinātas imunitātes rezultātā.

Slimība ir viena no vecākajām. Šo slimību var atrast smadzenēs, gremošanas traktā, locītavās un mugurkaulā, urīnā un mazās plankumos uz cilvēka ādas.

Speciālisti visvieglāk nosaka skarto ādu. Uz vietas ir mazas plombas, kuras laika gaitā palielinās izmēra, izplūst ar bālgans šķidrums.

Tuberkulozes izraisītājs parasti tiek pacelts, runājot ar slimnieku, kad viņš sēž vai šķaudās. Parasti slimība norit bez simptomiem vai ir atklāta, bet tuberkulozes PCR diagnoze ļauj to konstatēt agrīnā stadijā un ārkārtas gadījumos.

Slimības simptomi: ilgstošs mitrs klepus, drudzis, drebuļi, pārmērīga svīšana naktī, asas svara zudums, noguruma sajūta un vājums.

Visbīstamākais ir slimības atklātā forma. Persona, kas cieš no tuberkulozes, spēj inficēt veselīgus cilvēkus.

Vispopulārākais plaušu saslimšanas simptoms ir hemoptīze. Tas notiek jebkurā slimības formā.

Dažās situācijās tas var izraisīt asiņošanu no cilvēka plaušām. Tas ir ļoti bīstams un prasa steidzamu medicīnisku iejaukšanos.

Lai novērstu un atpazītu tuberkulozi, eksperti norāda: paraugu - tuberkulīna testu, bioloģiskā materiāla pārbaudi, fluorogrāfiju, rentgena un asins analīzi, krēpu vai siekalām.

Slimības diagnostika

Uzlabota slimības diagnoze - tā ir pareiza un ārstēšanas sākumā. Vairumā gadījumu parastās patogēnu noteikšanas metodes ne vienmēr ietekmē un jau ir novecojušas.

Vissvarīgākais veids, kā identificēt un diagnosticēt plaušu slimības, ir medicīniskās pārbaudes. Parasti lieto PCR diagnostiku. Šis pētījums tika atklāts nesen, 1983. gadā, ar amerikāņu bioķīmiķi Mullis.

Tests pacientam ar plaušu tuberkulozi tiek veikts vienīgi īpašos gadījumos, kad ir grūti noteikt diagnozi vai nav iespējams instrumentāli noteikt slimību.

Polimerāzes ķēdes reakcija ir uzticama PCR metode. Šī analīze ļauj noteikt cēloni, cik ilgi tas ir asinīs, urīnā un muguras smadzenēs. Šāda medicīniskā pārbaude ir visdrošākais.

PCR analīze dod 100% rezultātu.

Tam ir augsta jutība, kas pirmo reizi stundu laikā pēc infekcijas palīdz atpazīt slimību, pirms parādās simptomi. Šī analīzes metode dod rezultātu dažu stundu laikā pēc bioloģiskā materiāla piegādes. Šīs analīzes sēšana tiek veikta trīs reizes, bet slimā vēdera aspirācija tiek veikta tikai slimnīcā.

Rezultātu noteikšanai tika izstrādāti trīs kritēriji: augsta precizitāte, jutība līdz 90%, specifiskums.

Dažos gadījumos PCR testu izmanto:

  1. diagnosticēt plaušu tuberkulozi;
  2. noteikt slimības avotu;
  3. ārpuslīnijas lokalizācijas definīcija;
  4. atkārtošanās diagnoze.

Novērtēt rezultātu un noteikt pareizu ārstēšanu, var būt tikai speciālists. Ir ļoti svarīgi piešķirt pareizu ārstniecības sistēmu tuberkulozes noteikšanai, ir jāveic tests par patogēna uzņēmību pret tuberkulozes ierīcēm.

Daudzi tuberkulozes medicīniskie testi

Jūs varat veikt vajadzīgo analīzi divos veidos: ņemt asiņu vai siekalošanu no cilvēka vai veikt krēpu.

PCR asins analīzes var būt divu veidu: ELISA un PCR. Šāds pētījums palīdz kontrolēt ārstniecības efektivitāti.

ELISA palīdz atrast antivielas cilvēka organismā, kas pretoties tuberkulozes mikrobiem. Šis pētījums tiek veikts reizi dienā. Galvenais trūkums ir zemais jutīgums, kas ļauj noteikt tikai tādu slimību ar zemu infekcijas līmeni.

Populārākais un efektīvākais pētījums ir mikobaktēriju tuberkulozes analīze. Ar viņu ārsti var viegli atrast baktēriju DNS cilvēka asinīs. Šo metodi izmanto arī, lai noteiktu baktēriju skaitu, lai kontrolētu pacienta ārstēšanu, lai noteiktu agrīnu atkārtošanos.

PCR siekali ir viena no vismodernākajām pētījumu metodēm. Šāda analīze palīdzēs identificēt infekcijas baktērijas siekalās. Izmantojot PCR, palielina kaitīgo mikroorganismu DNS fragmentu skaitu.

Kultūras metode paredzēta cilvēka krēpju pārbaudei mikrobakteriju noteikšanai.

Sagatavošanās PCR testēšanai

Uzmanību, jums ir pareizi sagatavot siekalus PCR. Ja netiek ievērotas visas receptes, analīze var būt nepareizi pozitīva.

Pirms testa ir aizliegts smēķēt, uzņemt ēdienu un medikamentus, kā arī patērēt alkoholu 12 stundas. Ir aizliegts zobus nosusināt, jūs nevarat lietot skalošanu, atsvaidzinātāju mutē un zobu diegā.

Ir aizliegts izmantot lūpu krāsu un iesaistīties intīmas attiecībās. Atļauts izskalot muti ar tīru vārītu ūdeni;

Šī pārbaude palīdzēs identificēt: herpes, hlamidiju, tuberkulozi, pneimonijas patogēnus, oncovīrusus, barolleozi, mononukleozi, HIV, visu veidu hepatītu, masaliņām.

Mikobaktēriju analīze galvenokārt tiek veikta strīdīgos gadījumos, proti, ja ir grūti noteikt diagnozi vai saskaroties ar pacientu ar tuberkulozi, pirms operācijas uzsākšanas, lai noteiktu slimību. Izmanto sievietes grūtniecības pārbaudei, jo šī metode ir drošākā mātei un auglim.

Dažreiz analīze tiek veikta privātā klīnikā, jo pacients neievēro testēšanas noteikumus, bet tajā pašā laikā viņš uztraucas par visiem simptomiem. Analīzi var veikt, ja pēc Mantoux pārbaudes veikšanas speciālisti nav pārliecināti, vai pacients ir bērns.

Medicīnisko pārbaužu priekšrocības un trūkumi tuberkulozes noteikšanai

PCR ir populārākais un efektīvākais veids, kā noteikt slimību.

Tā lielākā atšķirība no citiem pētījumiem ir ātrs un precīzs rezultāts.

Šīs medicīniskās pārbaudes priekšrocība ir tā, ka to var veikt uroloģiskiem, ginekoloģiskiem, onkoloģiskiem, infekcijas, hematoloģiskiem, plaušu, gastroenteroloģiskiem un citiem pētījumiem.

Šādas medicīniskās izpētes galvenā priekšrocība ir tāda, ka asins analīze, krēpas un siekalas ir gatavas īsā laikā (slimības noteikšanai būs nepieciešamas 5 stundas). Šāda medicīniska pārbaude ļauj veikt pārbaudes, ja ir aizliegtas vai nepieejamas noteiktas slimības izpētes metodes. Lieliski, lai atklātu recidīvu cilvēkiem.

Pateicoties šai analīzei, kļuva iespējams veikt pētījumus par jebkuru bioloģisko vidi. Ir atļauts ņemt materiālus no bērniem. PCR ļauj identificēt ierosinātāju jebkurā slimības stadijā. Pateicoties augstajai jutībai, mikrobi var atrast, pat ja tajā atrodas tikai dažas baktērijas.

PCR metode paplašina savas spējas. To izmanto arī, lai noteiktu paternitāti, jaunu gēnu, mutāciju, DNS elementu šķērsošanai utt.

Šī pētījuma trūkumi ir dārga aptaujas metode.

Pēc medicīniskās palīdzības pēc asins analīzes nelielu daudzumu dzīvu vai mirušu patogēnu klātbūtne pēc medicīniskās izmeklēšanas var dot pozitīvu rezultātu.

Baktērijas un mikrobi var izmainīt mutācijas, pēc kurām PCR nevarēs identificēt un identificēt, tāpēc tikai speciālists var noteikt vajadzīgās vides izpēti, pretējā gadījumā šāda medicīniskā pārbaude būs neefektīva.

Pēc testēšanas ir negatīvs rezultāts, taču tas neizslēdz iespēju, ka persona ir inficējusies ar tuberkulozi. Šāda medicīniska pārbaude tiek veikta pacientiem ar smagu plaušu slimību, ja citi pētījumi nesniedz precīzus rezultātus. PCR būs noderīga cilvēkiem ar plaušu un ārkārtas tuberkulozi.

Diemžēl medicīnas iekārtas tuberkulozes patogēnu noteikšanai ir ļoti dārgas.

Valsts slimnīcas un klīnikas to nevar atļauties, bet apmaksātas klīnikas īsā laikā veic pacientu pārbaudes un gatavo rezultātu sniegšanu.

Vai Mantoux testam ir kontrindikācijas? Tiks veikta PCR analīze tuberkulozes gadījumā.

Tuberkuloze ir bīstama slimība, kuru var veiksmīgi ārstēt ar savlaicīgu diagnostiku.

Viens no visinformatīvākajiem pētījumiem, lai identificētu slimību agrīnā stadijā, sauc par PCR (polimerāzes ķēdes reakcijas) metodi.

PCR analīze ir ne tikai visinformatīvākais, bet arī viens no vispiemērotākajiem pētījumiem, kas agrīnā stadijā var atklāt tuberkulozi.

Kas ir PCR analīze?

Visi dzīvie mikroorganismi, tostarp vīrusi un baktērijas, savā struktūrā satur RNS un DNS molekulas. Izceļot šīs skābes, ar lielu noteiktību ir iespējams skaidri pateikt, kādi svešķermeņi ir cilvēka asinīs, un veikt precīzu diagnozi.

PCR metodes būtība ir bioloģisko šķidrumu paraugu speciāla apstrāde, kuras rezultātā var noteikt, kuras sugas pieder tajā esošie mikroorganismi.

Tuberkulozes PCR analīze: indikācijas, priekšrocības un trūkumi

PCR tehniku ​​lieto cilvēkiem ar smagiem plaušu bojājumiem šajos gadījumos un elpošanas ceļu izpausmēm (smags klepus, hemoptīze), ja nav iespējams precīzi diagnosticēt slimību saskaņā ar klīniskajiem simptomiem.

Ieteicams veikt pētījumu un pēc tieša saskarsme ar slimības nesēju. Priekšrocības, kas viņam ir:

  • izpildes ātrums - lai iegūtu rezultātu, nav nepieciešams audzēt patogēnu kultūru vai veikt citas sarežģītas procedūras;
  • ļoti informatīvs - diagnosticējot tuberkulozi, analīzes precizitāte sasniedz 90% un augstāka;
  • augsta jutība un specifitāte - identificēt patogēnus materiālā var būt tikai viena vīrusa šūna;
  • universālums - analīzei piemēroti praktiski visi bioloģiskie šķidrumi: krēpas, asinis, bronhu lavāža.

Salīdzinājumam: krēpu uztriepes mikroskopijas precizitāte, ko izmanto tuberkulozes noteikšanai, ir tikai 40-50%, un ar mazu patogēnu skaitu samazina līdz 10% vai mazāk. Krēpas kultūra ir daudz informatīvāka, bet rezultātu sasniegšanai tas aizņem 2 līdz 8 nedēļas.

Jūs varat izmantot PCR par tuberkulozi, nevis Mantoux, ja personai ir jebkādas kontrindikācijas paraugam.

Šīs tehnikas trūkumi ietver risku iegūt kļūdaini negatīvu rezultātu. Citiem vārdiem sakot, specifiskas DNS trūkums krēpās, asinīs vai urīnā vēl nenorāda uz tuberkulozes neesamību pacientam.

Ir svarīgi. Bērnu tuberkulozes diagnostikā PĶR analīzes jutība ir zemāka nekā pieaugušajiem un ir apmēram 25-83%.

Foto 1. Mantoux aizstāšana ar PCR bērnam ir laba izvēle, ja viņam ir alerģija vai bieži ir slimība.

Procedūra PCR analīzei

PĶR analīzes procedūru veic, izmantojot īpašu ierīci, ko sauc par amplifikatoru, un sastāv no četrām pakāpēm. Pētījumam ir nepieciešamas DNS sekcijas, no kurām sāk molekulu sintēze, nukleotīdi (DNS molekulu bāzes), kā arī polimerāze vai fermentu, kas paātrina procedūru.

  1. Bioloģisko materiālu savākšana (krēpas, asinis, bronhu lavāža).
  2. Paraugu sasilda līdz aptuveni 98% temperatūrai, lai iznīcinātu DNS ķēžu primāro struktūru.
  3. Atkal vai temperatūras pazemināšana dažus grādus, lai saistītu grunts ar DNS daļu.
  4. Molekulu sintēze, kas vajadzīga, lai iegūtu rezultātu.

Pēc 25-30 šādu ciklu veikšanas tiek izveidots zināms daudzums vīrusu DNS eksemplāru, no kura ir viegli noteikt slimības izraisītāju.

Uzmanību: PCR analīze neatšķir "mirušos" mikroorganismus un "dzīvo", tāpēc rezultāts var būt pozitīvs uz noteiktu laiku pēc ārstēšanas.

Sagatavošanās analīzei

Ja tuberkulozes gadījumā tiek veikts PCR asins tests, tad nav nepieciešama īpaša apmācība, taču pacientiem ieteicams ievērot vispārējos noteikumus: atturēties no ēšanas vismaz 8 stundas, izslēgt alkoholu un lietot medikamentus, nedarīt stundu pirms materiāla ņemšanas.

Aizcietējums tiek savākts no rīta pēc mutes skalošanas un rūpīgas skalošanas.

Ja eksudāts ir slikti izdalījies, atkrēpošanas līdzeklis jālieto naktī vai ieelpojot. Mikrokremenis ar gļotām, puvi, baltiem vai dzelteniem plankumiem ir diagnosticējošs.

Ja analīzei nav iespējams ņemt krēpu, patogēnu identificēšanai izmanto bronhu uztriepes. Šāda analīze neprasa sagatavošanu, un materiāls tiek ņemts šādi. Ar balināšanas šļirces palīdzību pacientam trachea ielej nātrija hlorīda šķīdumu, kas izraisa stipru klepu - pētījumos izmanto izskalošanas šķidrumu.

Uzmanību. Analīzes rezultāts izkropļo antibiotikas, heparīnu un citas zāles, ko lieto vietējai ārstēšanai, tāpēc pētījumu ieteicams lietot 10-14 dienas pēc ievadīšanas.